Стрептококки окраска по граму

Содержание
  1. Стрептококк пневмонии окраска по граму
  2. Микробиологическая диагностика бактериальных пневмоний
  3. Микроскопия готовых препаратов Streptococcus pneumoniae
  4. Бактериоскопическое исследование мокроты
  5. Приготовление препаратов для бактериоскопического исследования
  6. Окраска по Цилю-Нильсену
  7. Окраска по Граму
  8. Обеззараживание мокроты, посуды и предметов, бывших в соприкосновении с ней
  9. Окрашивание по Граму: методика и теоретическое объяснение
  10. Структура клеточной стенки
  11. Основные различия грамположительных и грамотрицательных бактерий
  12. Суть метода окрашивания
  13. Причины различного характера окрашивания
  14. Примеры Грам(+) и Грам(-) бактерий
  15. Тинкториальные свойства – способность микроорганизмов окрашиваться
  16. Для чего нужно окрашивание?
  17. Особенности разных бактерий при окрашивании
  18. Стафилококки
  19. Стрептококки
  20. Энтеробактерии
  21. Эшерихии
  22. Структурные особенности бактерий
  23. Окрашивание стрептококков
  24. Окрашивание стафилококков
  25. Окрашивание пневмококков
  26. Гранулоциты

Стрептококк пневмонии окраска по граму

Стрептококки окраска по граму

Окрашивание по Граму — это экспрессный метод исследования, позволяющий установить наличие бактерий в образце и дифференцировать их как грамположительные либо грамотрицательные. Метод основан на химических и физических свойствах клеточной оболочки. [1] Метод Грама почти всегда применяют в качестве первого шага при диагностике бактериальных инфекций.

Метод был предложен датским ученым Г.К.Грамом, который разработал его в 1882 и опубликовал в 1884 году, как способ, позволяющий дифференцировать сходные по симптомам бактериальные инфекции: Streptococcus pneumoniae (пневмококк) и Klebsiella pneumoniae. [2]

Использованные источники: ru.wikihow.com

Микробиологическая диагностика бактериальных пневмоний

И ОСТРЫХ РЕСПИРАТОРНЫХ ЗАБОЛЕВАНИЙ (ОРЗ)

Основным возбудителем (около 60%) бактериальных пневмоний в настоящее время является пневмококк (Streptococcus pneumoniae), реже (30-40%) – клебсиеллы (Klebsiella pneumoniae), хламидии (Chlamydophila pneumoniae), микоплазмы (Mycoplasmapneumoniae),стафилококк (Staphylococcus aureus), гемофильные палочки (Haemophilus influenzae), легионеллы (Legionella pneumophila).

Подходы к лабораторной диагностике бактери­альных пневмоний и ОРЗ, независимо от вида возбудителя, принципиально, одинаковы.

Материалом для исследования являются мокрота, отделяемое слизистой оболочки трахеи и бронхов, промывные воды бронхов, экссудат из плев­ральной полости, кровь, спинномозговая жидкость при менин­гите, отделяемое зева и носа при ОРЗ.

Микроскопический метод (микроскопия мазков из исследуемого материала, окрашенных по Граму) имеет ориентировочное значение. Наличие в препаратах значительного количества удлиненных ланцетовидных, грамположительных диплококков, окруженных капсулой (Streptococcus pneumoniae – рис.

[attention type=yellow]

19), скоплений грамположительных кокков в виде гроздьев (S.aureus)или грамотрицательных коккобактерий (H.influenzae) позволяет поставить пред­варительный диагноз бактериальной пневмонии и служить ориентиром для назначения антибактериальной терапии.

[/attention]

Рис. 19. Пневмококк(Streptococcus pneumoniae). Окраска по Граму. х 900

Бактериологическое исследованиеявля­ется ведущим методом диагностики пневмоний и ОРЗ бактериальной этиологии, которое дает возможность не только выделить возбудителя инфекции, но и определить его чувствительность к антибиотикам.

Для выделения пневмококка (Streptococcus pneumoniae)осуществляют посев исследуемого материала на МПБ с глюкозой и на кровяной МПА. Посевы выращивают в термостате при 37 0 С в течение суток.

Выросшие на кровяном МПА нежные колонии окружены зеленоватой зоной гемолиза.

Из колоний готовят мазок, изучают морфологические и тинкториальные свойства, после чего остаток колонии пересевают на скошенный кровяной МПА или сахарный (или сывороточный) МПБ с целью выделения чистой культуры и ее идентификации на основании комплекса биологических свойств.

Дифференциация S.pneumoniae и S.pyogenes основывается на проверке чувствительности выделенной культуры к желчи и оптохину, а также способности ферментировать инулин.

Серотипирование пневмококка проводится с помощью РА на стекле с использованием типоспецифических пневмококковых сывороток (известно около 90 серова­ров пневмококка, из которых 23 играют важную роль в патологии человека). Для серотипирования пневмококков может использоваться реакция Нейфельда (фено­мен набухания капсулы стрептококка в присутствии типоспецифической сыворотки).

Для изоляции клебсиелл выполняют посев исследуемого материала на МПА с пенициллином (для подавления сопутствующей микрофоры) в чашках Петри или на дифференциально-диагностические среды с лактозой и индикатором бром-тимоловым синим, на которых спустя сутки культивирования при 37 0 С образуются блестящие выпуклые слизистые колонии (на дифференциально-диагностической среде колонии имеют желтый цвет в результате разложения лактозы). На 2 день колонии исследуют визуально и с помощью микроскопического метода (окраска по Граму и Гинсу-Бурри для выявления капсул), после чего пересевают типичные колонии на среду Ресселя или скошенный МПА для выделения чистой культуры возбудителя. На 3 день учитывают рост на указанных средах (окрашивание столбика и скошенной части среды Ресселя в желтый цвет с разрывами агара в результате расщепления глюкозы и лактозы с образованием газа) и проводят идентификацию культуры клебсиелл по основным биологическим свойствам (образование капсулы, отсутствие подвижности, биохимические и антигенные свойства).

Для выделения микоплазм производят посев на специальные питательные среды с добавлением сыворотки, на которых они не ранее чем через месяц после образуют характерные микроскопические колонии с ровными краями и зернистой структурой. Выделенную чистую культуру микоплазм идентифицируют по биохими­ческим и антигенным свойствам.

Выделение легионелл, являющихся медленно рас­тущими микроорганизмами, осуществляют с применением селективных питательных сред сложного состава, содержащих дрожжевой экстракт и другие факторы роста, а также различные антибиотики для подавления роста сопутст­вующей микрофлоры.

Легионеллы относятся к медленно растущим микроорганизмам, однако микроколонии, видимые под мик­роскопом, появляются на 2-е сутки роста, тогда как макроскопически видимые мелкие колонии (2-4 мм) правильной округлой формы, с ровными краями и блестящей поверхностью с характерным ро­зовым или сине-зеленым ободком и опалесцирующим центром — через 3-5 суток. Идентификацию выделенной чистой культуры до уровня рода проводят на основании изучения биологических свойств. Для видовой идентификации разработаны ИФМ, газожидкостная хрома­тография, генодиагностика (рестрикционный анализ, метод ДНК-зондов).

Серологический метод диагностики пневмоний, вызванных пневмококками, микоплазмами, хламидиями и легионеллами при исследовании парных сывороток крови больных (в остром периоде и в стадию реконвалесценции) с помощью РСК, РНГА, ИФА не является клинически обязательным и имеет эпидемиологическое значение. Для определения антител к легионеллам используют, кроме того, непрямой ИФМ с антигеном из легионелл (диагностический титр 1:32 и более).

Экспресс-методы. Разработан иммуноферментный тест для определения в моче специфичного антигена легионелл, а также иммунохроматографический тест для выявления в моче пневмококкового антигена, однако широкое применение этих методов ограничено.

Генодиагностика. Предложена ПЦР для диагностики хламидиозов и микоплазмозов, однако метод широко в клинической практике не используется.

Биопроба.Исследуемыйматериал для выделения пневмококков вводят внутрибрюшинно белым мышам или морским свинкам. Культуру пневмококка выделяют из крови и органов погибшего или забитого животного, а также проводят бактериоскопию мазков-отпечатков, сделанных из его органов. В настоящее время метод практически не применяется.

Использованные источники: studopedia.org

Микроскопия готовых препаратов Streptococcus pneumoniae

Учесть результаты посевов крови в сахарный МПБ

Микробиологическая диагностика менингококковой инфекции

Возбудитель Царство: Procaryota; Отдел: Gracilicutes; Семейство: Neisseriaceae; Род: Neisseria; Вид: Neisseria meningitidis

Факторы вирулентности Структурные:капсула – защита от фагоцитоза, реснички и белки наружной мембраны– факторы адгезии и колонизации;Эндотоксин–обладает пирогенным, некротическим и летальным действием.Ферменты агрессии: гиалуронидаза, нейраминидаза, фибринолизин, протеаза– разрушает IgA

Клинические формыменингококковой инфекции. У большинства заразившихся заболевание не возникает. У 10% развивается острый назофарингит, а у отдельных лиц – генерализованные формы инфекции: менингококкемия и /или менингит.

[attention type=red]

Исследуемый материал слизь из носоглотки и зева (носительство), кровь (сепсис), ликвор (менингит).

[/attention]

Бактериоскопический метод

Бактериологический метод

Питательные среды и условия культивирования требовательны к питателным средам, используют среды с добавлением сыворотки крови, асцитической жидкости. Капнофилы — культивирование в атмосфере 5 – 8% СО2 48 часов при t = 37 0 С.

Культуральные признаки на средах с добавлением сыворотки крови образуют прозрачные колонии, голубоватые в проходящем свете.

Источник: https://detsad14elochka.ru/streptokokk-pnevmonii-okraska-po-gramu/

Бактериоскопическое исследование мокроты

Стрептококки окраска по граму

Для проведения данных исследований необходимо следующее оснащение рабочего места:

  1. Предметные и покровные стекла.
  2. Шпатели и иглы.
  3. Смесь Никифорова.
  4. Газовая или спиртовая горелка.
  5. Пастеровская пипетка с резиновым баллончиком.
  6. Водяная баня с мостиком.
  7. Иммерсионное масло.
  8. Микроскоп.
  9. Фильтровальная бумага.
  10. Пинцеты Корне.
  11. Бумажки Синева.
  12. Основной фуксин.
  13. 96° этиловый спирт.
  14. Фенол.
  15. Глицерин.
  16. Концентрированная соляная кислота.
  17. Метиленовая синька.
  18. Дистиллированная вода.
  19. Генцианвиолет.
  20. Реактив Люголя.
  21. Едкий натр (NaOH).
  22. Бензин или ксилол.

Приготовление препаратов для бактериоскопического исследования

Для бактериоскопического исследования готовят обычно два препарата: один для обнаружения микобактерий туберкулеза и другой для обнаружения прочих микроорганизмов.

Для первого препарата отбирают те же частицы, которые были предназначены для микроскопии, для второго — гнойные частицы.

Взятый материал распределяют по предметному стеклу до получения достаточно тонкой ажурной сеточки (материал на первом стекле распределяют на 2/3 его поверхности, на втором — в центре).

Оба препарата фиксируют троекратным проведением над пламенем горелки. Первый препарат окрашивают по Цилю — Нильсену, второй — по Граму.

Окраска по Цилю-Нильсену

Для окраски препаратов по Цилю-Нильсену необходимы следующие краски и реактивы:

  1. Фуксин Циля: основного фуксина 1 г, глицерина 4 капли, этилового спирта 96° 10 мл, карболовой кислоты (5% раствор фенола) 5 мл, дистиллированной воды 90 мл. К фуксину, помещенному в фарфоровую ступку, прибавляют глицерин, хорошо растирают, постепенно приливают карболовую кислоту, спирт и воду. Фильтруют.
  2. 3% раствор солянокислого спирта: 3 мл концентрированной соляной кислоты удельного веса 1,19 и 97 мл 96° этилового спирта.
  3. 0,2 % водный раствор метиленовой синьки — 1 г метиленовой синьки растворяют в 500 мл дистиллирован- вой воды.   

Техника окраски. На фиксированный препарат кладут полоску фильтровальной бумаги (уже и короче предметного стекла), на которую наливают в избытке фуксин Циля.

Затем препарат нагревают до появления паров (достаточно троекратно медленно провести его над пламенем горелки), дают ему остыть в течение 3-5 минут, сбрасывают с помощью пинцета бумажку, промывают препарат водой и наливают на него 3% раствор солянокислого спирта для обесцвечивания на 20 секунд. После этого препарат промывают водой и вновь повторяют обесцвечивание. Материал должен быть серовато-розового цвета. Затем на препарат на 20-30 секунд наливают 1: 500 водный раствор метиленовой синьки, краску сливают, препарат промывают водой и высушивают, установив в вертикальном положении на полоску фильтровальной бумаги.

Высушенный препарат рассматривают под микроскопом с иммерсией, с поднятым конденсором.

В препарате микобактерии туберкулеза (рис. 60) красного цвета, нежные, тонкие, слегка изогнутые, иногда зернистые. Иногда обнаруживают микобактерип туберкулеза в виде так называемых осколков (в составе тетрады Эрлиха).

Рис. 60. Микобактерии туберкулеза в мокроте. 1 – окраска по Цилю-Нильсену, 2 – в люминесцентном микроскопе.

[attention type=green]

Все остальные элементы, в том числе и другие микроорганизмы, окрашены в синий цвет. С целью обнаружения мпкобактерий туберкулеза препарат тщательно исследуют, продвигая от одного продольного края к другому и поперек мазка.

[/attention]

Во всех сомнительных случаях рекомендуют обработать препараты жавелевой водой
Результат исследования оформляют, используя следующую формулировку: «микобактерип туберкулеза не обнаружены» или «микобактерип туберкулеза обнаружены», и отмечают приблизительное их количество, например, «единичные в препарате», «единичные в поле зрения» и т. д.

В настоящее время находит все большее распространение люминесцентный способ обнаружения микобактерий туберкулеза в мокроте. Микобактерип туберкулеза имеют золотисто-желтое свечение на черном фоне препарата (рис. 60, 2).

В тех случаях, когда количество микобактерий туберкулеза в мокроте незначительно, для их обнаружения применяют метод обогащения (флотация), который состоит в следующем. В бутылку с нешироким горлышком (емкостью 250 мл) помещают 12-20 мл мокроты, добавляют равный объем 0,5% раствора КОН и встряхивают 5-10 минут.

Затем приливают около 10 мл дистиллированной воды и 0,5-1 мл бензина или ксилола, взбалтывают 10-15 минут и доливают дистиллированную воду гак, чтобы горлышко бутылки было заполнено. Смесь оставляют на 1-2 часа до образования на поверхности жидкости сливкообразного слоя.

На два предметных стекла, заранее расположенных на мостике над водяной баней, нагретой до 60-65°, каплями, с помощью пастеровской пипетки, 5-6 раз наносят сливкообразный слой, каждый раз после подсыхания предыдущей капли.

Мазки окрашивают фуксином Циля на водяной бане (без дополнительной фиксации) в течение 10 минут, промывают водой, 3-4 минуты обесцвечивают 3% раствором солянокислого спирта, вновь обмывают водой, докрашивают 0,2% водным раствором метиленовой синьки, высушивают и исследуют под микроскопом.

Окраска по Граму

Для окраски препаратов по Граму требуются следующие краски и реактивы:

  1. Разведенный фуксин Циля (фуксин Пфейффера): 1 часть фуксина Циля + 9 частей дистиллированной воды.
  2. Реактив Люголя.
  3. 1 % спиртовой раствор генцианвиолета — 1 г генцианвиолета растворяют в 100 мл 96° этилового спирта. Этот раствор краски можно заменить бумажкой, приготовленной по методу Синева (белую фильтровальную бумажку пропитывают 1% спиртовым раствором генцианвиолета, затем высушивают и разрезают на мелкие квадратики соответственно размеру мазка).

Техника окраски. На фиксированный препарат накладывают бумажку Синева и смачивают ее водой (при отсутствии бумажки Синева ее заменяют белой фильтровальной бумажкой, на которую наносят несколько капель 1% спиртового раствора генцианвнолета). Через 1-2 минуты бумажку сбрасывают и на препарат наливают 1-2 капли реактива Люголя.

Через 1-2 минуты препарат обесцвечивают 1-2 каплями 96° этилового спирта до появления бледно-серой окраски материала, смывают водой, на 10-15 секунд наносят сруксин Пфейффера, после чего вновь смывают водой и высушивают. В препаратах могут быть обнаружены (рис.

61) стафилококки, стрептококки, диплококки, палочки Пфейффера, спирохеты Плаута-Венсана, актиномицеты и другие микроорганизмы.

Рис. 61. Различные микроорганизмы в мокроте: диплококки (1), палочки Пфейффера (2), стрептококки (3), стафилококки (4), диплобациллы Фридлендера (5), симбиоз Венсана (6), мицелий актиномицет (7).

Обеззараживание мокроты, посуды и предметов, бывших в соприкосновении с ней

После проведенного исследования мокроту сжигают или обеззараживают. Последнее достигается следующими способами: а) автоклавированием в течение одного часа при 1,5 атм.

; б) кипячением в течение одного часа в 1-2% растворе соды; в) обработкой 5% раствором лизола, карболовой кислоты или смесью, состоящей из равных объемов 5% раствора хлорамина и 5% раствора сернокислого аммония, в течение 12-24 часов.

После обеззараживания посуду тщательно моют водой и высушивают.

Металлические предметы (шпатели, иглы) обеззараживают прокаливанием над огнем. Во избежание переноса микроорганизмов из одной порции мокроты в другую шпатель и иглу немедленно прокаливают после отбора соответствующих частиц.

Покровные стекла опускают в небольшую плоскую чашечку с 40% раствором серной кислоты на 12-24 часа. Затем кислоту сливают, а стекла неоднократно промывают водопроводной и дистиллированной водой. Вымытые стекла высушивают и используют для последующих исследований.

Источник: http://ginekolog.my1.ru/publ/klinicheskie_issledovanija/mokrota/bakterioskopicheskoe_issledovanie_mokroty/40-1-0-771

Окрашивание по Граму: методика и теоретическое объяснение

Стрептококки окраска по граму

Окрашивание по Граму широко распространено в микробиологии, так как это один из самых простых способов дифференциации бактерий в зависимости от состава их клеточной стенки.

По Граму все бактерии можно разделить на грамположительные (Грам(+)) и грамотрицательные (Грам(-)).

Метод окрашивания по Граму был разработан в 1884 году, и с того времени не утратил популярности, хотя и неоднократно модифицировался.

Структура клеточной стенки

Окрашивание по Граму позволяет выявить, к грамположительным или грамотрицательным относится та или иная бактерия. Деление бактерий на Грам(+) и Грам(-) осуществляется в соответствие со строением их клеточной стенки.

Клеточная стенка в наибольшем количестве содержит пептидогликан (муреин) – сложное вещество, в состав которого входят пептапептид и гликан. Гликан состоит из чередующихся остатков N-ацетилглюкозамина и N-ацетилмурамовой кислоты, соединенных друг с другом β-1,4-гликозидными связями. Пептидогликан обеспечивает поддержание формы клетки, осмотическую защиту, а также антигенные функции.

Основные различия грамположительных и грамотрицательных бактерий

У различных бактерий толщина слоя пептидогликана не одинакова. У бактерий, которые относят к грамположительным, она составляет от 15 до 80 нм, в то время как у грамотрицательных – от 2 до 8 нм.

В то же время у грамотрицательных бактерий под слоем пептидогликана есть особая структура, которой нет у грамположительных бактерий – периплазматическое пространство. Это пространство заполнено гидролитическими ферментами – β-лактамазой, рибонуклеазой 1, фосфатазой.

Именно эти ферменты ответственны за резистентность грамотрицательных бактерий в отношении многих антибиотиков.

[attention type=yellow]

Слой пептидогликана Грам(-) бактерий связан с липополисахаридом – антигенной структурой, содержащей эндотоксин. У Грам(+) бактерий похожие функции выполняют тейхоевые кислоты.

[/attention]

У грамотрицательных бактерий присутствует дополнительная структура – внешняя мембрана.

Суть метода окрашивания

Перед тем как начать окрашивание, готовят мазки исследуемых бактерий. Для этого на предметное стекло капают воду и бактериальной петлей добавляют туда культуру микроорганизмов.

Затем, после полного высыхания воды, мазок фиксируют – предметное стекло проносят несколько раз над пламенем горелки.

Окрашивание мазков по Граму более эффективно, чем окрашивание живых бактерий – с мертвыми клетками лучше связываются молекулы красителя.

Окрашивание производится в несколько этапов:

  1. На фиксированный мазок накладывают небольшие кусочки фильтровальной бумаги и наливают основной краситель – генцианвиолет или метиленовый синий.
  2. Спустя 3-5 минут снимают окрашенную фильтровальную бумагу и заливают мазок раствором Люголя на 1 минуту. При этом препарат темнеет.
  3. Сливают раствор Люголя и обрабатывают мазок чистым этиловым спиртом: капают несколько капель на препарат, спустя 20 секунд сливают. Процедуру повторяют 2-3 раза.
  4. Промывают стекло с исследуемым препаратом дистиллированной водой.
  5. Производят дополнительное окрашивание – докрашивают препарат фуксином. Спустя 1-2 минуты краситель смывают.
  6. После высыхания воды изучают мазок под микроскопом. Грамположительные бактерии будут иметь сине-фиолетовый цвет, грамотрицательные – розовый или красный.

Причины различного характера окрашивания

Как было описано выше, при окрашивании бактерий по Граму грамположительные бактерии окрашиваются в сине-фиолетовый цвет, а грамотрицательные – в красный или розовый.

Причина дифференциального окрашивания бактерий по этому методу состоит в том, что после попадания в клетку растворимой формы генцианвиолета краситель переходит в нерастворимую йодную форму.

Во время обработки бактерии этиловым спиртом под действием этого неполярного растворителя из мембраны экстрагируются липиды. После этого мембрана становится пористой и больше не является существенным препятствием для вымывания красителя.

Однако пептидогликан более устойчив к действию неполярных растворителей, в том числе и спирта. Именно он препятствует вымыванию красителя, поэтому бактерии с толстым муреиновым слоем окрашиваются в сине-фиолетовый цвет (грамположительно), и после обработки спиртом свой цвет не меняют.

Тонкий муреиновый слой грамотрицательных бактерий не может удержать в клетке молекулы красителя, поэтому после действия спирта они становятся бесцветными – окрашиваются грамотрицательно.

После воздействия на мазок фуксином при окрашивании по Граму грамположительные бактерии остаются сине-фиолетовыми, а грамотрицательные приобретают розово-красный оттенок.

Примеры Грам(+) и Грам(-) бактерий

К грамотрицательным относятся цианобактерии, серобактерии, железобактерии, хламидии, риккетсии, уксусные бактерии, многие метилобактерии, тионовые бактерии, арсенитобактерии, карбоксидобактерии.

Грамположительными являются бифидобактерии, многие водные бактерии, стрептококки и стафилококки.

Источник: https://FB.ru/article/395322/okrashivanie-po-gramu-metodika-i-teoreticheskoe-obyyasnenie

Тинкториальные свойства – способность микроорганизмов окрашиваться

Стрептококки окраска по граму

Каждый вид бактериальной клетки имеет определенные морфологические, ферментативные, культуральные и тинкториальные свойства. Изучая их, биологи устанавливают вид микроба, его характеристики и жизнедеятельность, особенности структур. Тинкториальные особенности, или свойства, дают возможность определить характеристики окрашенной бактерии.

Для чего нужно окрашивание?

Бактерии представляют собой полупрозрачные микроорганизмы, которые преломляют световые лучи. Учитывая эти их свойства, при обычной микроскопии без применения окрашивания они не видны. Определение микробов в мазках может осуществляться различными видами микроскопии:

  • аноптральная микроскопия;
  • фазово-контрастная;
  • в темном поле;
  • с опущенным конденсором.

Однако наиболее информативным метод исследования морфологических и культуральных свойств возбудителя считается изучение тинкториальных свойств убитых и окрашенных микроорганизмов.

Для микроскопического исследования тинкториальных свойств применяются в основном анилиновые красящие вещества. Существует две разновидности этого метода определения тинкториальных свойств – с использованием простой или сложной окраски микроорганизмов.

  1. Для простой окраски необходимо использование одного красителя – она применяется при необходимости проведения обзорной микроскопии, когда выполняется определение типа взаиморасположения бактерий и их формы.
  2. Сложная окраска требует последовательного применения нескольких красителей. Она используется для определения химических веществ в составе структур клетки (цитохимическое исследование), изучения деталей строения микроорганизмов.

Окрашивание по Граму. Кокки (шаровидные) — грамположительные и бациллы (палочки) — грамотрицательные

Тинкториальные свойства возбудителя представляют собой его восприимчивость к окрашивающему веществу, устойчивость к кислотам, щелочам, спиртам, равномерность окрашивания, особенности окраски по методу Грама, метахроматичность (окрашивание элементов клетки в цвет, не соответствующий цвету красителя).

Особенности разных бактерий при окрашивании

Морфологические и тинкториальные свойства бактерий различных типов отличаются. Рассмотрим наиболее часто встречающиеся их них.

Стафилококки

Наиболее часто требуется выявление тинкториальных свойств стафилококка у людей с гнойными заболеваниями кожи, слизистых, ранах, при абсцессах, сепсисе.

Морфология стафилококков представлена клетками шаровидной формы, диаметр которых в среднем составляет 0,8-0,9 мкм. В чистой культуре стафилококков выявляются скопления клеток, напоминающие грозди винограда, кучки.

Нередко определяют наличие стафилококков в гнойном содержимом в виде единичных, парных кокков, иногда – цепочки из нескольких элементов.

[attention type=red]

Окрашивание стафилококка для выявления тинкториальных свойств обычно проводят анилиновыми основными красителями.

[/attention]

Учитывая свойства стафилококка, можно дать следующую характеристику данных микроорганизмов: грамположительные кокки, не образующие капсул и спор, неподвижные.

В соответствии с культуральными и биохимическими свойствами стафилококка рост этих микроорганизмов наиболее активен при 37°С. Рост стафилококка на питательной среде при этом не зависит от наличия либо отсутствия кислорода.

Стрептококки

Представляют собой грамположительные клетки округлой формы, которые располагаются парами либо цепочками. При росте микроорганизмов в питательной среде жидкой консистенции образуются длинные цепочки микробов. Данные бактерии являются неподвижными, не образующими споры. Для некоторых разновидностей (например, пневмококка) характерно образование полисахаридной капсулы.

Энтеробактерии

Одним из наиболее многочисленных семейств бактерий являются энтеробактерии. Важнейшее место среди таких микробов отводится роду эшерихий. Подобными свойствами обладают представители кишечной палочки рода сальмонелла и шигелла.

Такие бактерии представляют собой грамотрицательные палочки, которые достигают размеров 1-5 мкм длиной и 0,4-0,8 мкм шириной. Спор у кишечной палочки не бывает, однако некоторые виды способны образовывать капсулу. Эти палочки являются подвижными за счет жгутиков. Роды данных микробов подразделяются на виды в зависимости от того, какие ферментативные свойства характерны для них:

  • выделение сероводорода;
  • образование газа при процессе ферментации глюкозы;
  • расщепление лактазы.

Эшерихии

Морфологически клетки эшерихий имеют вид грамотрицательной прямой палочки, размеры которой составляют 2-6 мкм в длину и 0,4-0,6 мкм в ширину. Для эшерихий характерно наличие жгутиков, благодаря которым они подвижны. При посеве на твердые среды для эшерихий характерно прорастание колоний S- либо R-формы. При посеве на жидкие среды культура эшерихий дает осадок и помутнение.

Эшерихия коли (Escherichia coli)

С целью микробиологической диагностики эшерихий применяются испражнения (кишечный эшерихиоз), отделяемое раны, ликвор, моча, кровь. Однако для выявления и изучения палочки эшерихий наиболее информативен бактериологический метод исследования тинкториальных свойств.

Структурные особенности бактерий

В составе клетки микроба, как правило, есть стенка клетки (оболочка), цитоплазматическая мембрана, а также непосредственно цитоплазма, содержащая нуклеотид и включения (наличие гранул). Некоторые разновидности бактерий обладают жгутиками, пилями (фимбрии либо реснички), образуют споры либо капсулы.

Оболочка микроорганизмов определяет форму клетки, обеспечивает ее защиту от неблагоприятных воздействий окружающей среды, а также от повышения осмотического давления внутри бактерии.

Стенка микроба имеет сложную структуру и химический состав, которые различаются у грамположительных и грамотрицательных бактериальных клеток. Грамположительные микробы обладают толстой клеточной стенкой, содержащей тейхоевые кислоты и небольшое количество липидов.

Стенка грамотрицательных микробов состоит из полисахаридного и полипептидного слоев.

Наружная поверхность клеточной стенки покрыта слизистым слоем. У части микроорганизмов этот слой может увеличиваться за счет набухания, образуя при этом капсулу.

Она также имеет в своем составе полисахариды, иногда – полипептиды. Капсула маловосприимчива к красителям.

По этой причине для изучения таких микробов используют негативные методики тинкториального окрашивания структур бактерий (например, Бурри-Гинса).

[attention type=green]

Для части патогенных бактерий (например, пневмококка) характерно образование капсулы лишь в организмах человека либо животного.

[/attention]

При микроскопическом исследовании бактерии также обращают внимание на особенности окрашивания цитоплазмы и ее структур.

Окрашивание цитоплазмы может быть гомогенным (однородным) либо гетерогенным (определяются включения, или гранулы, неорганической и органической природы).

Для изучения включений клетки применяют также специальные методики окрашивания цитоплазмы (по Нейссеру). В составе цитоплазмы также определяют наличие таких структур, как ядро, или нуклеоид.

Окрашивание стрептококков

Это грамположительные микроорганизмы, которые выявляют методом окраски по Граму в мазках смыва лаважа бронхов, гноя, частицах ткани перикарда. Наиболее ярко данные бактерии окрашиваются синькой Леффлера. Они характеризуются расположением клеток подобно цепочке.

Окрашивание стафилококков

Отличие стафилококков от стрептококков заключается в том, что последние хорошо окрашиваются при выявлении тинкториальных свойств анилиновыми красящими веществами.

Морфологически в тканях либо выделениях больного хорошо определяются микроколонии стафилококков в виде тетрад. Исключительно по морфологическим и тинкториальным свойствам стафилококков трудно их дифференцировать от стрептококков.

Поэтому целесообразно также проведение бактериологического исследования на наличие стафилококка.

Окрашивание пневмококков

Выявление пневмококков происходит при исследовании цереброспинальной жидкости, промывных вод, а также легочной ткани, полученной при вскрытии.

Тинкториальные и морфологические свойства пневмококков выглядят так: они представлены грамположительными диплококками, покрытыми капсулой, расположенными в виде цепочки либо поодиночно.

Окрашивание пневмококков довольно эффективно анилиновыми красителями (например, метиленовым синим). Однако в случае наличия капсулы клетки необходимо специальное окрашивание.

Гранулоциты

Гранулоциты различаются по двум основным признакам структур клетки: наличие в толще цитоплазмы специфической зернистости (гранул) и сегментированного ядра. Каждый тип гранулоцитов содержит две разновидности гранул: специфические и неспецифические.

Под видом неспецифических гранул выступают особые формы лизосом – структур, которые содержат гидролитические ферментные вещества.

В зависимости от свойств специфических гранул в каждой клетке различают клетки базофилов, нейтрофилов и эозинофилов. Основное отличие нейтрофилов заключается в наименьшем размере гранул, составляющих всего 0,1-0,3 мкм. Состав этих гранул отличается содержанием фагоцитинов, лизоцима, а также щелочной фосфатазы. Основная функция нейтрофилов, как клеток человека, – защитная.

Бактерии и микроорганизмы

Работаю врачом ветеринарной медицины. Увлекаюсь бальными танцами, спортом и йогой. В приоритет ставлю личностное развитие и освоение духовных практик. Любимые темы: ветеринария, биология, строительство, ремонт, путешествия. Табу: юриспруденция, политика, IT-технологии и компьютерные игры.

Источник: https://probakterii.ru/prokaryotes/raznoe/tinktorialnye-svojstva.html

Сам себе врач
Добавить комментарий

;-) :| :x :twisted: :smile: :shock: :sad: :roll: :razz: :oops: :o :mrgreen: :lol: :idea: :grin: :evil: :cry: :cool: :arrow: :???: :?: :!: