Суправитальная реакция

Признаки биологической и клинической смерти

Суправитальная реакция

1) высыхание роговицы; 2) феномен «кошачьего зрачка»; 3) снижение температуры;. 4) тела трупные пятна; 5) трупное окоченение
 

Определение признаков биологической смерти:

1. Признаками высыхания роговицы является потеря радужной оболочкой своего первоначального цвета, глаз как бы покрывается белесой пленкой – «селедочным блеском», а зрачок мутнеет. 2. Большим и указательным пальцами сжимают глазное яблоко, если человек мертв, то его зрачок изменит форму и превратится в узкую щель – «кошачий зрачок».

У живого человека этого сделать не возможно. Если появились эти 2 признака, то это означает, что человек умер не менее часа тому назад. 3. Температура тела падает постепенно, примерно на 1 градус Цельсия через каждый час после смерти. Поэтому по этим признакам смерть удостоверить можно только часа через 2–4 и позже. 4.

Трупные пятна фиолетового цвета появляются на нижележащих частях трупа. Если он лежит на спине, то они определяются на голове за ушами, на задней поверхности плеч и бедер, на спине и ягодицах. 5. Трупное окоченение – посмертное сокращение скелетных мышц «сверху – вниз», т.е. лицо – шея – верхние конечности – туловище- нижние конечности.

Полное развитие признаков происходит в течение суток после смерти.

Признаки клинической смерти:

1) отсутствие пульса на сонной или бедренной артерии; 2) отсутствие дыхания; 3) потеря сознания; 4) широкие зрачки и отсутствие их реакции на свет.

Поэтому, прежде всего, необходимо определить у больного или пострадавшего наличие кровообращения и дыхания.

Определение признаков клинической смерти:

1. Отсутствие пульса на сонной артерии – основной признак остановки кровообращения;

2.

Отсутствие дыхания можно проверить по видимым движениям грудной клетки при вдохе и выдохе или приложив ухо к груди, услышать шум дыхания, почувствовать (движение воздуха при выдохе чувствуется щекой), а также поднеся к губам зеркальце, стеклышко или часовое стекло, а также ватку или нитку, удерживая их пинцетом. Но именно на определение этого признака не следует тратить время, так как методы не совершенны и недостоверны, а главное требуют на свое определение много драгоценного времени;

3. Признаками потери сознания являются отсутствие реакции на происходящее, на звуковые и болевые раздражители; 4. Приподнимается верхнее веко пострадавшего и определяется размер зрачка визуально, веко опускается и тут же поднимается вновь. Если зрачок остается широким и не суживается после повторного приподнимания века, то можно считать, что реакция на свет отсутствует.

Если из 4-х признаков клинической смерти определяется один из первых двух, то нужно немедленно приступить к реанимации.

[attention type=yellow]

Так как только своевременно начатая реанимация (в течение 3–4 минут после остановки сердца) может вернуть пострадавшего к жизни.

[/attention]

Не делают реанимацию только в случае биологической (необратимой) смерти, когда в тканях головного мозга и многих органах происходят необратимые изменения.

Стадии умирания

•    Предагональное состояние характеризуется  выраженными расстройствами кровообращения и дыхания и приводящими к развитию тканевой гипоксии и ацидозу (длится от нескольких часов до нескольких дней).

•    Терминальная пауза — остановка дыхания, резкое угнетение деятельности сердца, прекращение биоэлектрической активности головного мозга, угасанием роговичных и других рефлексов(от нескольких секунд до 3-4 минут).•    Агония (от нескольких минут до нескольких дней; может продлеваться реанимацией до недель и месяцев) – вспышка борьбы организма за жизнь.

Она начинается обычно с кратковременной задержкой дыхания. Затем наступает ослабление сердечной деятельности  и развиваются функциональные  расстройства различных систем организма. Внешне: синюшный кожный покров бледнеет, глазные яблоки западают, нос заостряется, нижняя челюсть отвисает.

•    Клиническая смерть (5-6 мин) Глубокое угнетение ЦНС, распространяющееся на продолговатый мозг, прекращение деятельности кровообращения  и дыхания, обратимое состояние. Агония и клин смерть могут быть обратимыми.•    Биологическая смерть – необратимое состояние. Раньше всего необратимые с изменения наступают в коре ГМ – «смерть мозга».

Устойчивость к кислородному голоданию у различных органов и тканей неодинакова их гибель происходит в разные сроки после  остановки сердца:1) кора ГМ2) подкорковые центры и спинной мозг3) костный мозг – до 4 ч4) кожа, сухожилия, мышцы, кости – до 20 – 24 ч.- можно установить давность наступления смерти.

Суправитальные реакции  – способность отдельных тканей после смерти реагировать на внешние раздражения (химические, механические, электрические).  С момента наступления биологической смерти до окончательной гибели отдельных органов и тканей проходит около 20 часов. По ним устанавливают время с момента наступления смерти.

Для установления  давности наступления смерти использую химическое, механическое и электрическое раздражение гладких мышц радужной оболочки глаз, мышц лица и скелетных мышц. Электромеханические мышечные реакции – способность скелетных мышц реагировать изменением тонуса или сокращением в ответ на механическое или электрическое воздействие. Эти реакции исчезают к 8-12 ч посмертного периода.

При механическом воздействии (удар металлическим стержнем) на двуглавую мышцу плеча в раннем посмертном периоде образуется так называемая идиомускулярная опухоль (валик).

В первые 2 ч после смерти она высокая, возникает и исчезает быстро; в период от 2 до 6 ч она невысокая, появляется и исчезает медленно; при давности наступления смерти 6-8 ч определяется лишь пальпаторно в виде локального уплотнения в месте удара.Сократительная активность мышечных волокон в ответ на раздражение их электрическим током.

Порог электровозбудимости мышц постепенно нарастает, поэтому в первые 2-3 ч после смерти наблюдается сокращение всей мускулатуры лица, в период от 3 до 5 ч – сжатие только круговой мышцы рта, в которую вводят электроды, а через 5-8 ч заметны лишь фибриллярные подергивания круговой мышцы рта. Зрачковая реакция на введение в переднюю камеру глаза вегетотропных медикаментов (сужение зрачка при введении пилокарпина и расширение от действия атропина) сохраняется до 1,5 сут после смерти, но время реакции все более замедляется.

Реакция потовых желез проявляется посмертной секрецией в ответ на подкожное введение адреналина после обработки кожи йодом, а также синим окрашиванием устьев потовых желез после нанесения проявляющей смеси крахмала и касторового масла. Реакция может быть выявлена в пределах 20 ч после смерти.

Диагностика смерти

ОМП – необходимо установить, что перед нами тело человека без признаков жизни или же это труп.Методы диагностики основаны:1. проба на сохранность жизниСконцентрированы вокруг т.н. «витального треножника» (сердце легкие и мозг)Основаны на доказательстве наличия главнейших жизненных функций:- целости нервной системы- наличия дыхания- наличия кровообращения

2. выявление признаков смерти

Признаки указывающие на наступление смерти:

•    Отсутствие дыхания ( пульс, сердцебиение, различные народные методы – например, стакан воды ставится на грудную клетку)•    Отсутствие чувствительности  на болевые,  термические и обонятельные (нашатырь) раздражители

•    Отсутствие рефлексов со стороны роговицы и зрачков и т.д.

 Пробы на сохранность жизни:

a.    Прощупывание сердечного толчка и наличие пульса в области радиальных плечевых сонных височных бедренных артериях (панадоскоп — прибор). Алоскутация — метод прослушивания сердца.b.     выслушивание сердца (1 удар на 2 минуты)c.

    при просвечивании кисти руки живого человека –Признак Белоглазова (феномен кошачьего глаза)•    Уже через 10 и 15 минут после наступления смерти•    При сдавливании глазного яблока зрачок умершего приобретает вид вертикально идущей щели или овала.Абсолютные, достоверные признаки смерти – ранние и поздние изменения трупа.

Ранние изменения в трупе:1.    Охлаждение (снижение темп до 23 гр в прямой кишке, первый час – на 1-2 градуса, следующие 2-3 часа на 1, потом на 0,8 градусов и т. д.) Необходимо измерить не менее 2х раз (в начале осмотра мп и в конце.2.    Мышечное окоченение (начало 1-3 часа, все мышцы  к 8 часов)3.

[attention type=red]

    Подсыхание трупа (пергаментные пятна) – посмертные ссадины, пятна в углах глаз.4.    Трупные пятна. Расположении в нижней части тела в зависимости от расположения тела человека.

[/attention]

Стадии появления их1) гипостаз  1-2 часа после смерти (натек — застой крови в венах и капиллярах нижележащих частей тела в следствии стекания крови после смерти под влиянием силы тяжести, но возможность ее перетекания в следствии передвижения тела сохраняется, при ее передвижении нельзя отметить в каком ранее состоянии лежало тело2) стаз 10 – 24 часа застой крови, что  при передвижении тела он имеет свойство оттека, то прежние пятна остаются заметными.3) имбибиция после 24- 36 часов  застой крови до такой степени, что кровь не может перетекать при передвижении тела человека.5. Аутолиз – разложение тканейПоздние изменения трупа•    Гниение (начинаются с передней стенки живота – 1-2 сутки в области живота), образование пузырей, эмфизема.(Формы консервации они же)•    мумификация (процесс обезвоживания тканей и органов трупа и их высыхание.•    Жировоск (омыление)

•    торфяное дубление — поздняя консервация трупа под воздействием гуминовых кислот в торфяных болотах.

Установление причины смерти

1. выявление признаков действия повреждающего фактора на организм2. установления действия прижизненного этого фактора, давность повреждения3. установление танатогенеза – последовательность структурно-функциональных нарушений, вызванных взаимодействием организма с повреждающим фактором, приводящим к смерти

4. исключение иных повреждений, которые могли привести в смертельному исходу.

Первичные причины смерти:

1. повреждения, несовместимые с жизнью (повреждения жизненно важных органов — сердце, г.м. – при транспортной травме).2. кровопотеря – быстрая потеря от трети до половины количества имеющейся крови обычно приводит к смертельному исходу. (обильна и острая кровопотеря).

Признак острой кровопотери — пятна Мнакова — полосчатые бледно красные кровоизлияния под  внутренней оболочкой левого желудочка сердца.3. сдавление важных для жизни органов излившейся кровью или всосавшимся воздухом4. сотрясение важных для жизни органов5.

асфиксия аспирированной кровью – попадание крови в дыхательные органы6.

Эмболия – закупорка  кровеносного сосуда, нарушающая кровоснабжение органа (воздушная — при повреждении крупных вен,жировая — при переломах длинных трубчатых костей, обширнных разможжениях подкожной жировой ткани, когда капли жира попадают в кровяное руслоа затем во внутренние органы- г.м.

и легкие;  тромбоэмболия — при заболевании сосудов — тромбофлебите, тканевая — при попадании в кровяное русло частиц тканей и органов при их размозжении; твердыми телами — инородные предметы — осколки пули)

7. Шок – остроразвивающийся патологический процесс вызываемый воздействием на организм сверхсильного психологического явления

Вторичные причины смерти

1. инфекции (абсцесс мозга, гнойный перитонит, плеврит, менингит, сепсис)2.

интоксикации (например, при crush syndrome или синдром сдавливания) травматический токсикоз, характеризующийся местными и общими патологическими изменениями в ответ на длительное и обширное повреждение мягких тканей.

3. другие заболевания неинфекционного характера (гипостатическая пневмония (застой и воспаление легких) и др.)

Сохранить в соцсетях:

Похожие публикации:

Источник: https://krasgmu.net/publ/priznaki_biologicheskoj_i_klinicheskoj_smerti/6-1-0-730

Суправитальная реакция

Суправитальная реакция

А. Центральные связаны с непосредственным влиянием на функцию иммунных клеток:

1) клональное абортирование

2) клональная делеция – элиминация антигеном имм. клеток в тимусе (вероятно, апоптоз незрелых Т-лимфоцитов наступает вследствие воздействия на них Аг без сопутствующих сигналов – интерлейкина Iи интерлейкинаII), а также клеток В-зависимой популяции

3) повышение активности супрессорных Т-клеток

4) блокада эффекторных клеток (напр., блокада синтеза В-клеткой антител вследствие связывания её антигенных рецепторов поливалентным антигеном

5) блокада, опосредованная введенными антителами – искусственно введенные АТ быстро элиминируют Аг и имм.ответ на развивается.

6) отсутствие контрсупрессии  Т-хелперы не активируются

Б. Периферическиене связаны с изменением функции иммунокомпетентных клеток. Обуславливают в некоторых системах состояние видимой ареактивности: «перегрузка антигеном», сывороточные антитела

34. Клеточные факторы иммунитета для оценки иммунного статуса организма (Е-РОК, РБТЛ, РТМЛ ).

Метод е-рок (е-розеткообразующих клеток)

Этот метод – общепризнанный стандартый метод колич. учета Т-лимфоцитов в периферической крови людей.

При смешивании лимфоцитов чка и эритроцитов Баранова последние избирательно адсорируются только Т-лимфоцитами и образуют т.н. Е-розетки.

Розеткообразующей клеткой (РОК) считается лимфоцит, присоединивший 3 и более эритроцитов Баранова. Исходя из абсолютного кол-ва лейкоцитов в 1 л крови вычисляют абсолютное кол-во Т-лимфоцитов в 1 л крови.

У здоровых людей Т-лимфоциты составляют 40-70% общего числа лимфоцитов.

Рбтл (реакция бласттрансформации лимфоцитов

Основан на наличии митогенов, специфически действующих на Т- или на В-лимфоциты, что позволяет раздельно судить о функциональной активности Т- и В-клеток. (Так, ФГА и конканавалин А стимулируют Т-кл., а митоген Лапокосса и ЛПС эшеришии (E.coli) – В-клетки. Схема постановки реакции:

1) выделение лимфоцитов

2) подсчет кол-ва клеток и доведение суспензии до нужной концентрации

3) посев клеток и их последующее культивирование в течение 72 часов

4) регистрация результатов, включая:

а) приготовление мазков для подсчета процента стимулированных лимфоцитов

б) определение интенсивности включения Н-3-тимидина (3Н)

Ртмл (реакция торможения миграции лейкоцитов)

Используется для изучения акитвности лимфокининов.

В основе РТМЛ лежит способность гранулоцитов и моноцитов крови, а также макрофагов к свободной миграции, которая тормозится под действием лимфокина.

Миграцию и ее торможение под влиянием лимфокинов изучают в специальных капиллярах или на стекле под слоем агарозы. Результаты ингибиции миграции оценивают по разности площадей миграции клеток.

Оценка гуморального иммунитета (В-системы) включает определение кол-ва В-лимфоцитов в крови с помощью теста розеткообразования лимфоцитов с эритроцитами, несущими на своей поверхности комплекс (антиэритроцитарные АТ + комплемент), с целью выявления на лимфоцитах рецепторов для комплемента и теста иммунофлюоресценции с использованием антисывороток против иммуноглобулинов чка. Функциональную активность В-лимфоцитов оценивают косвенно по уровню сывороточных иммуноглобулинов различных классов – IgG,IgM,IgA,IgE.

35. Комплемент. Свойства, структура, роль в организме, механизмы активации.

СИСТЕМА КОМПЛЕМЕНТАмногокомпонентная самособирающуюся систему белков сыворотки крови, к/я играет важную роль в поддержании гомеостаза. Активируется в процессе самосборки, т.е. последовательного присоединения к образующемуся комплексу отдельных фракций (их 9). Продуцируются онипечени, мононуклеарными фагоцитами и содержатся в сыворотке крови в неактивном состоянии.

Процесс активации комплемента инициируется 2 путями:

[attention type=green]

Классический путь (1-4-2-3-5-6…). Инициирующим фактором является иммунный комплекс Аг-Ат, причем только содержащие Fc-фрагменты – IgG и IgM могут связывать С1-фракцию комплемента.

[/attention]

При присоединенииС1 к иммунному комплексу образуетсяCl-эстераза → формируется энзиматически активный комплекс (С4b+С2а) –С3-конвертазой. Этот фермент расщепляет С3 на С3а и С3b.

При взаимодействии субфракции С3b с С4 и С2 образуетсяпептидаза, действующая на С5. Если инициирующий иммунный комплекс связан смембраной, то самособирающийся комплекс С1-4-2-3 обеспечивает фиксацию активированной фракцииС5, а затемС6 и С7.

Последние три компонента фиксируют С8 и С9. При этом С5а+С6+С7+С8+С9= мембраноатакующий комплекс, после его присоединениялизируется (гемолиз эритроцитов или бактериолизис).

Особенность альтернативного пути (D-B (P))в том, что инициация может происходить без участия иммунного комплекса за счет ЛПСстенки гр–, поверхностных структур вирусов, иммунных комплексов, включающих IgA и IgE.

В этом случае необходимо участие сывороточного белка (пропердин), который активен лишь в присутствии ионов Mg2+и факторов В и D.

Фактор Dв активной форме – протеиназа, расщепляет фактор В с образованием фрагментаВb, к/й в комплексе с С3b являетсяС3-конвертазой. Функцияпропердина– стабилизация комплекса С3b-Вb.

При активации комплемента появляются продукты протеолиза компонентов С4, С2, С3 и С5. Одни из них (фрагменты С4b, С2b, С3b, С5b) участвуют непосредственно в самосборке и активации системы комплемента.

В отличие от них низкомолекулярные фрагменты С3а и С5а (АНАФИЛАТОКСИНЫ) играют роль в патогенезе болезней иммунных комплексов и других заболеваний, при которых резко ↑ связывание и активация комплемента в .

Комплемент выполняет ряд функций:

цитолитическое и цитотоксическое действие клетки-«мишени»;

анафилотоксины участвуют в иммунопатологических реакциях;

↑ эффективность фагоцитоза иммунных комплексов (через Fc-рецепторы);

[attention type=yellow]

фрагмент С3b способствует связыванию и захвату иммунных комплексов фагоцитами, опсонизируя объекты фагоцитоза;

[/attention]

фрагменты С3b, С5а и Вb (хемоаттрактанты), участвуют в развитии воспаления.

В здоровом организме идет постоянное формирование иммунных комплексов (против Аг аутофлоры) белки комплемента быстро обновляются. Потребление комплемента резко ↑ при патологиях, связанных с усиленным образованием иммунных комплексов при инфекциях и иммунопатологических состояниях.

36. Радиоиммунный анализ.

Сходен с ИФА, но вместо фермента на иммуноглобулине фиксируется радиоактивная метка (напр., в состав Igвключается атом трития —3Н). После обработки препарата раствором таких иммуноглобулинов радиоактивное излучение регистрируется (с помощью микродатчиков либо методо сцинтилляций в геле, либо др. методом).

Метод очень чувствителен и относительно легко выполним.

37. Кооперация клеток в иммунном ответе. Процессинг антигенов макрофагами и В-лимфоцитами. Лимфокины.

Патрульные макрофаги, обнаружив в крови чужеродные белки (клетку), предъявляют его Т-хелперам (происходит процессингАГ макрофагами). Т-хелперы передают АГ информацию на В-лимфоциты, которые начинают бласттрансформироваться и пролиферировать, выделять нужный иммуноглобулин.

Меньшая часть Т-хелперов (индукторы) побуждают макрофагов и макрофаги начинают продуцировать интерлейкин I– активатор основной части Т-хелперов.

Те, возбуждаясь, в свою очередь объявляют всеобщую мобилизацию, начиная бурно выделятьинтерлейкин II (лимфокин), который ускоряет пролиферацию и Т-хелперов, и Т-киллеров.

Последние имеют специальный рецептор именно к тем белковым детерминантам, которые были предъявлены патрульными макрофагами.

[attention type=red]

Т-киллеры устремляются к клеткам-мишеням и разрушают их. Одновременно интерлейкин IIспособствует росту и созреванию В-лимфоцитов, которые превращаются в плазматические клетки. Тот же интерлейкинIIвдохнет жизнь в Т-супрессоры, которые замыкают общую реакцию иммунного ответа, останавливая синтез лимфокинов. Размножение иммунных клеток прекращается, но остаются лимфоциты памяти.

[/attention]

38. Реакция непрямой гемагглютинации и реакция коагглютинации, механизм, практическое использование.

Реакция непрямой гемагглютинации (РНГА).Ставится для обнаружения полисахаридов, белков, экстрактов бактерий, микоплазм, риккетсий и вирусов, иммунные комплексы которых с агглютининами в обычных классических РА увидеть не удается, или же для выявления антител в сыворотках больных к этим высокодисперсным веществам и мельчайшим микроорганизмам.

РНГА для серодиагностики инфекционных болезней.Используя РНГА для обнаружения антител в сыворотках больных, готовят ЭРИТРОЦИТАРНЫЕ АНТИГЕННЫЕ ДИАГНОСТИКУМЫ. Для этого эритроциты обрабатывают 15 мин раствором танина в разведении 1:20 000–1:200 000, что придает им устойчивость и повышает адсорбционную способность.

Затем их смешивают с известным антигеном и инкубируют в течение 2 ч при температуре 37С.. Сенсибилизированные антигеном эритроциты 2–3 раза отмывают изотоническим раствором натрия хлорида и добавляют к сыворотке, разведенной и разлитой в лунки панелей.

Контролем служат взвеси интактных и нагруженных антигеном эритроцитов, которые вносят в сыворотки, дающие заведомо положительную и отрицательную реакции.

Результаты реакции учитывают через 2 ч после инкубации в термостате и оценивают плюсами: «++++» – эритроциты покрывают лунку в виде зонтика с неровными краями; «–» – скопление эритроцитов в виде «пуговицы»

РЕАКЦИЯ КОАГГЛЮТИНАЦИИ

Используется для серотипирования моргов и для обнаружения АГ в биологических жидкостях.

Принцип реакции.Используется способность клетокS.aureusнеспецифически фиксировать на своей поверхности иммуноглобулинFC-фрагментом благодаря наличию особого белка А. Таким путем получаютстафилококковый антительный диагностикум.

Реакция ставится как обычная р-ция агглютинации на среде.

Источник: studfile.net

Источник: https://naturalpeople.ru/supravitalnaja-reakcija/

Подсчет ретикулоцитов в крови

Суправитальная реакция

Для проведения данных исследований необходимо следующее оснащение рабочего места:

  1. Предметные стекла.
  2. Шлифованные предметные стекла.
  3. Влажная камера.
  4. Смесители для белых и красных кровяных телец.
  5. Стекла с луночкой.
  6. Микроскоп.
  7. Бриллианткрезиловая синька.
  8. Абсолютный этиловый спирт.
  9. Метиловый спирт или смесь Никифорова (равные части этилового 96° спирта и эфира).
  10. Реактив Гайема или 3% раствор поваренной соли.
  11. Иммерсионное масло.
  12. Набор инструментов для укола в палец.

В зависимости от строения зернисто-сетчатой субстанции различают пять видов ретикулоцитов: пылевидный, венчикообразный, неполносетчатый, полносетчатый и клубкообразный (см. рис).

Различные группы ретикулоцитов по степени зрелости

Взятие крови с целью подсчета в ней ретикулоцитов производят по указанию врача. Чтобы подсчитать количество ретикулоцитов, их окрашивают. С этой целью используют:

  1. Способ прижизненной (суправитальной) окраски ретикулоцитов.
  2. Способ одновременной суправитальной окраски тромбоцитов и ретикулоцитов по Алексееву.

Рассмотрим данные способы более подробно.

Прижизненная (суправитальная) окраска ретикулоцитов

Для этого способа необходимы следующие реактивы:

  1. Абсолютный этиловый спирт: в сухую с притертой пробкой посуду помещают прокаленную безводную (белого цвета) сернокислую медь и приливают 1/4 часть абсолютного спирта. Содержимое взбалтывают. Абсолютный спирт (спирт, не содержащий воды) можно получить обезвоживая спирт сернокислой медью, предварительно прокаленной. Обезвоживание прекращают тогда, когда сернокислая медь перестает голубеть.
  2. Насыщенный раствор бриллианткрезиловой синьки в абсолютном спирте: к 80 мл абсолютного спирта прибавляют 1 г бриллианткрезиловой синьки.
  3. Азур I.

Техника прижизненной окраски и подсчета ретикулоцитов

Предметные стекла заранее покрывают насыщенным раствором бриллианткрезиловой синьки. Свежевыступившую каплю крови распределяют по предметному стеклу с краской, как при приготовлении мазка крови.

Препарат немедленно помещают на 6-8 минут во влажную камеру, после чего высушивают на воздухе и микроскопируют (окуляр 7Х, объектив 90X с поднятым конденсором). Ретикулоциты подсчитывают точно так же, как тромбоциты, с ограничителем поля зрения.

Ретикулоциты, окрашенные бриллианткрезиловой синькой, бледно-зеленые с сеточкой голубого или синего цвета (см. рис.).

Ретикулоциты, окрашенные бриллианткрезиловой синькой

Вместо бриллианткрезиловой синьки для окраски ре тикулоцитов можно использовать, согласно прописи Магиной, краску азур I (1 г азура I на 40 мл абсолютного спирта; выдерживают при комнатной температуре 2 дня).

Одновременная суправитальная окраска тромбоцитов и ретикулоцитов по Алексееву

Для этого способа применяют краску Алексеева.

В колбу емкостью 100 мл насыпают 1 г краски азур II и добавляют приготовленный в отдельной колбе реактив следующего состава: 5 г лимоннокислого натрия, 4 г хлористого натрия и 45 мл дистиллированной воды.

Содержимое колбы медленно нагревают на асбестовой сетке при постоянном помешивании, не доводя до кипения. Охлаждают, фильтруют. Фильтрат используют в качестве рабочего раствора краски.

Техника одновременной окраски и подсчета тромбоцитов и ретикулоцитов

В смеситель для лейкоцитов до метки 1,0 набирают краску Алексеева, вытирают кончик от краски и кладут на стол. Производят более глубокий, чем обычно, укол в палец. Кровь набирают до 4/5 объема расширенной части смесителя, следя за тем, чтобы в нее не попадали пузырьки воздуха.

Кровь быстро выдувают из капиллярной части смесителя на ватку, а остальное содержимое — в луночку предметного стекла. С луночки жидкость вновь набирают в смеситель. Двух-, троекратным повторением этой манипуляции смешивают кровь с реактивом.

Набрав последний раз жидкость в смеситель, его оставляют в горизонтальном положении на 15-30 минут для окрашивания ретикулоцитов и тромбоцитов. Затем смеситель встряхивают в течение минуты и выпускают 1-2 капли. Из последующих капель готовят тонкие мазки.

[attention type=green]

Препараты высушивают на воздухе, фиксируют метиловым спиртом и докрашивают краской Романовского в разведении 1-2 капли на 1 мл воды в течение 35-45 минут. Краску смывают водой, а мазки высушивают и микроскопируют. В мазке, окрашенном по Алексееву, ретикулоциты розовые с сеточкой синего цвета (см. рис.), а тромбоциты голубовато-сиреневого цвета.

[/attention]

Ретикулоциты, окрашенные по Алексееву

Подсчет ретикулоцитов и тромбоцитов производят одновременно на 1000 эритроцитов так же, как описано в теме «Тромбоциты». Результаты для ретикулоцитов выражают в promille; тромбоциты рассчитывают на 1 мм3 крови (для расчета учитывают количество эритроцитов, подсчитанных у данного больного).

В крови здоровых лиц насчитывают 5-10 % ретикулоцитов.

Источник: http://ginekolog.my1.ru/publ/klinicheskie_issledovanija/blood/podschet_retikulocitov_v_krovi/39-1-0-760

Сам себе врач
Добавить комментарий

;-) :| :x :twisted: :smile: :shock: :sad: :roll: :razz: :oops: :o :mrgreen: :lol: :idea: :grin: :evil: :cry: :cool: :arrow: :???: :?: :!: